الحاق ژنی زیرواحد b سم کلرا (ctb) با زیرواحد b انتروتوکسین شیگلا دیسانتری تیپ ۱ (stxb) ، همسانه سازی و بیان آن در باکتری e .coli
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماری زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1، انتروتوکسین شیگلا یا stxمی باشد، که از یک زیر واحد سمی آنزیماتیک به نام stxa و یک زیر واحد پنتامریک متصل شونده به رسپتور به نام زیر واحد b یا stxb تشکیل شده است. زیر واحد stxb مسئول اتصال زیر واحد سمی به گیرنده سطح سلولی gb3 بوده و در نهایت باعث ورود سم به درون سلول و اثرات آن می شود. زیر واحد b سم کلرا (ctb) به عنوان ادجوانت مخاطی قوی برای واکسیناسیون شناخته شده و همجوشی ژنتیکی آن با هترو آنتی ژن هایی مثل stxb باعث تقویت ایمنی همورال و مخاطی و پاسخ ایمنی علیه آن آنتی ژن می گردد. مواد و روش ها: در این مطالعه ژن های ctb و stxb پس از طراحی پرایمر به وسیله pcr تکثیر و در وکتور pgemهمسانه سازی شدند. ژن stxb به همراه لینکر غیرفورینی به روش برش آنزیمی با ژن ctb در وکتور pgem الحاق شدند و در نهایت قطعه کایمریکctb-stxb در وکتور بیانی pet28a(+) زیر همسانه سازی گردید. پروتئین کایمر تحت القای iptg بهینه سازی و به وسیله تکنیک sds-page و وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: قطعه کایمریک ctb-stxbدر وکتور بیانی pet28a(+) به وسیله توالی یابی، pcr و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین تولیدی به وسیله sds-page و وسترن بلات مورد تأیید قرار گرفت. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب تولیدی بعد از بررسی ایمنی زایی می تواند به عنوان کاندیدی برای واکسن مخاطی موثر و نوین علیه باکتری شیگلا دیسانتری تیپ 1 در نظر گرفته شود.
منابع مشابه
همسانه‌سازی و بیان ژن‌های ممزوجی دومن - a1 آنتی‌ژن حفاظتی با سیلوس آنتراسیس و زیرواحد B سم شیگلا در باکتری E. coli
Introduction: Shigella enterotoxin(STxB) is one of the major virulent factors in Shigella dysenteriae type 1 and E. coli O157:H7, which its immunogenicity, adjuvant and delivery characteristic have been proven. Anthrax is a common disease in humans and animals and identifies domain a-1 antibodies of protective antigen(PA) which is 62% of the PA antigens of Bacillus anthracis. Therefore, the pur...
متن کاملهمسانه سازی و بیان ژن های ممزوجی دومن - a۱ آنتی ژن حفاظتی با سیلوس آنتراسیس و زیرواحد b سم شیگلا در باکتری e. coli
مقدمه: یکی از فاکتورهای بیماری زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1 و e. coli o157:h7، انتروتوکسین شیگلایا (stxb) بوده که خاصیت ایمنی زایی، اجوانتی و دلیوری آن به اثبات رسیده است. سیاه زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام بوده و آنتی بادی دومن - a1 آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس 62 درصد آنتی ژن های مربوط به آنتی ژن حفاظت کننده (pa) باکتری باسیلوس آنتراسیس را شناسایی می کند. هدف ایـن ...
متن کاملکلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتی‌ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی
زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتی‌بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می‌کند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای ا...
متن کاملجداسازی، همسانه سازی و امتزاج ناحیه n-ترمینال ژن ipad شیگلا دیسانتریه و زیرواحد b سم ریسین
شیگلا دیسانتریه پاتوژن مهمی است که باعث ایجاد عفونت در روده انسان می شود. آنتی ژنipad نقش مهمی در بیماری زایی و ایجاد عفونت توسط شیگلا دارد. چالش استفاده از پروتئین ipad در طراحی واکسن مخاطی، قدرت پایین و عدم انتقال آن به بافتهای مخاطی روده می باشد. با اتصال ناقل و ادجوانت گیاهی rtb به آنتی ژن ipad، می توان به رفع چالش تولید واکسن مخاطی علیه شیگلوزیس پرداخت. این تحقیق با هدف ساخت یک کاست ژنی شا...
متن کاملهمسانه سازی، امتزاج و بررسی بیان کاست ژنی ctb و n ترمینال ipad در e. coli
زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان بوده که علیه آن واکسن وجود ندارد. یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماری زای موجود در شیگلا، پروتئین ipad است. همسانه سازیn ترمینال ژن ipad به همراه ژن ctbکه دارای نقش ادجوانتی و حاملی می باشد به شکل یک واکسن نوترکیب می توان سبب تقویت پاسخ ایمنی مخاطی شود. مواد و روش ها: طراحی پرایمر برای ژن های ipad و ctb بر مبنای طراحی انجام شده بر...
متن کاملهمسانه سازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع b باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری e. coli
پیش زمینه و هدف: سندرم بوتولیسم توسط نوروتوکسین های باکتری کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می شود. این نوروتوکسین ها دارای هفت سروتیپ از a – g می باشند. بهترین راه برای جلوگیری از سندرم بوتولیسم ایجاد شده توسط bont/b استفاده از واکسن های نوترکیب ساخته شده ی ناحیه اتصالی آن می باشد. چون دارای اپی توپ های کافی برای تحریک سیستم ایمنی می باشد.مواد و روش ها: ابتدا سکانس ژن ناحیه اتصالی را از سایت ncbi گر...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی فساجلد ۲، شماره ۳، صفحات ۱۳۵-۱۴۱
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023